Förbereda en agarosgel för elektrofores

Beredning av agarosgel för elektrofores

Obs: Bär alltid engångshandskar!

Steg-för-steg-instruktioner

Vägning av agarospulver:use ett vägningspapper och en elektronisk våg för att mäta 0,3 g agarospulver (baserat på ett 30 ml-system).

Förbereder TBST-buffert:preparera 30 ml 1x TBST-buffert i en 100 ml Erlenmeyer-kolv.

Att lösa upp agarospulver:pplacera agarospulvret i TBST-bufferten och skaka väl.Lägg in demtill en mikrovågsugn och värm (vanligtvis i 50 sekunder, täckt med aluminiumfolie) tills det är helt upplöst.

Kylning och tillsats av nukleas:use handskar för att ta bort blandningen från mikrovågsugnen och låt den svalna något i kallt vatten tills den är varm (cirka 60°C). Tillsätt 2 µl nukleas (Eb-ersättning) medan du skakar för att blanda ordentligt.

Förbereda gelformen:

• Cluta och torkagelbricka och gelgjutningsanordningav elektroforestanken.
•  Psnöra gelénbrickai den inre tanken och sätt in kammen i ett fast läge.
• Blanda agarosgellösningen, kyld till ca 65°C, och häll försiktigt den pågelbrickaigelgjutningsanordning, bred ut den långsamt tills den bildar ett jämnt gelskikt på glasplattan.
• Låt den stå i rumstemperatur tills gelén stelnar helt.
• Ta försiktigt bort kammen vertikalt och ta bort tejpen.
• Placera gelénbrickain i elektroforestanken.

Viktigt: Se till att det inte finns några luftbubblor vid kamtänderna. Ytan på vätskan ska vara slät utan krusningar.

Kör gelen

Laddar gelen

Efter att gelén stelnat, placera den i elektroforestanken och häll elektroforesbufferten tills gelén är nedsänkt.

Förbereda prover

• Ta markören och laddningsbufferten från kylskåpet.
• Tillsätt 6 µl laddningsbuffert till proverna och blanda väl.
• Använd en mikropipett, ladda långsamt proverna i geléns stora brunnar (var noga med att inte punktera gelén och dispensera inte hela volymen för att undvika luftbubblor).
• Ladda markören i någon av de små brunnarna (kom ihåg dess position).

Starta elektrofores

• Täck elektroforestanken och påbörja elektrofores omedelbart efter att gelén laddats.
• Ställ in spänningen på 60-100V. Proverna kommer att migrera från den negativa elektroden (svart) till den positiva elektroden (röd).
• Högre spänning förkortar det effektiva separationsintervallet för agarosgelen.
• Stoppa elektroforesen när bromfenolblått färgämne når cirka 1 cm från gelplattans nedre kant.

Observation av resultat

Efter att ha separerat banden, stoppa elektroforesen, ta ut gelén och upptäck och fotografera den direkt.

Använd ett gelbildsystem för att fotografera och observera banden (kontrollera om det finns några band för markören eller proverna).

Efter att ha skaffat din gelbandskarta, hitta markören. Baserat på markören kan du bestämma målbanden!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) har tillverkat elektroforesprodukter i mer än 50 år. Vi presenterar våra horisontella elektroforessystem här föragarosgelelektrofores.Väljahorisontella elektroforessystemfrån Beijing liuyi för ditt gelelektroforesexperiment för att hjälpa din forskning inom bioteknikindustrin.

Vi erbjuder olika modeller av horisontella elektroforestankar för gjutning och småkörningagarosgelar för storaagarosgeler

Urvalsguide för horisontell nedsänkt gelelektroforesenhet

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) har specialiserat sig på tillverkning av elektroforesinstrument i mer än 50 år med vårt eget professionella tekniska team och FoU-center. Vi har en pålitlig och komplett produktionslinje från design till besiktning och lager, samt marknadsföringsstöd. Våra huvudprodukter är elektroforescell (tank/kammare), elektrofores strömförsörjning, blå LED-transilluminator, UV-transilluminator, gelbild- och analyssystem etc. Vi levererar även labbinstrument som PCR-instrument, virvelblandare och centrifug för laboratoriet.

Om du har någon inköpsplan för våra produkter, tveka inte att kontakta oss. Du kan skicka ett meddelande till oss på e-post[e-postskyddad]eller[e-postskyddad], eller ring oss på +86 15810650221 eller lägg till Whatsapp +86 15810650221, eller Wechat: 15810650221.

Skanna QR-koden för att lägga till på Whatsapp eller WeChat.